(五)Bioruptor的使用技巧
超聲過程中保證充分的降溫預(yù)冷
Bioruptor水槽式超聲破碎儀與普通探頭式超聲儀一樣,也存在超聲能量會隨著溫度升高而急劇衰減的特性,超聲發(fā)生器在工作的時候會產(chǎn)熱,造成超聲元件升溫,從而導(dǎo)致超聲能量下降,超聲過程中超聲能量的大小變化自然會影響實驗的穩(wěn)定性和重復(fù)性,所以,在實驗開始時保證預(yù)冷到4攝氏度再開啟超聲,同時實驗過程中不要一次性長時間超聲,要多次停止超聲保證充足的降溫時間。這樣子做既保證了實驗的穩(wěn)定高效,也保護了超聲儀免受高溫損傷,延長儀器使用壽命。
有些公共實驗室,儀器會不斷地被使用,超聲儀很可能無法保證充分的降溫,在排到自己使用的時候,建議不要著急開啟超聲,讓儀器充分的降溫遇冷至少半個小時再使用,不但對自己的實驗有益,同時也保護了超聲儀。
每次填滿補齊超聲管于適配器
Bioruptor超聲破碎儀使用管架式的適配器,一次可以放置多個超聲管,建議每次無論處理幾個樣品管都把空余的樣品管孔用空白對照樣品管補齊,保證每次超聲每個超聲管分配的超聲能量是一樣的,便于建立穩(wěn)定的實驗流程,這樣子做的好處是,每次無論處理幾個樣品,按照穩(wěn)定的實驗流程都可以保證得出相同的超聲效果。
三分法振蕩離心樣品管
特別針對于樣品量非常少的體系,比如10ul,Bioruptor超聲能量大,很容易就把樣品管中微量的樣品顛兒到管壁上,超聲失效。所以要根據(jù)你的實驗循環(huán)數(shù)定期振蕩離心樣品管,保證樣品有效超聲。比方說你要做15個循環(huán),就把機器調(diào)整為5個循環(huán),5個循環(huán)結(jié)束后,步進電機也停止轉(zhuǎn)動,取出適配器,取出樣品管振蕩離心,然后再上機器處理5個循環(huán),接下來同樣取出適配器,取出樣品管振蕩離心,接下來再處理5個循環(huán)即可。同時也建議不要建立太微量的樣品體系,盡量多一些,這樣子就可以避開由于太多體積處于無效超聲而導(dǎo)致實驗結(jié)果不均一不穩(wěn)定。
超聲時間能少則少
超聲時間不是越長效果就越好,如果通過10個超聲循環(huán)就已經(jīng)獲得很好的實驗結(jié)果,又加了1個循環(huán)并沒有明顯的改善,那么以后就只用10個超聲循環(huán)即可??上攵?,在超聲過程中超聲波沒有選擇性地在破碎樣品,超聲破碎時間越長又可能導(dǎo)致過度超聲或者產(chǎn)生更多的損傷等。所以能少超堅決不多超!
此文是博誼生物公司員工原創(chuàng)于2016年,首次發(fā)表于百度文庫,目前已不知所蹤,后續(xù)發(fā)表于生物器材網(wǎng),文章名:Bioruptor 水槽式非接觸式超聲破碎儀心得體會。然后在網(wǎng)上被人到處發(fā)布,雖說是有傷知識產(chǎn)權(quán),但是能夠讓更多人有所收獲更彰顯了此文的價值,博誼生物決定在官網(wǎng)分為6篇陸續(xù)發(fā)布。
上海博誼生物是一家以代理進口實驗室儀器為主的專業(yè)設(shè)備公司,自成立以來,一直致力于提升國內(nèi)實驗室硬件水平以及為客戶提供高效的實驗解決方案。資深代理比利時Diagenode產(chǎn)品,Bioruptor Plus超聲破碎儀做ChIP及細胞破碎等,Bioruptor Pico核酸打斷儀用于NGS二代測序,Megaruptor DNA剪切儀用于三代測序等。